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본문이 수정되지 않는 박제글입니다.

미치겠습니다. re transformation을 진행하는데 "저만" colony가 안나와요

2024.12.12

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안녕하세요

제약회사에서 인턴으로 근무하는 대학교 4학년 학부생입니다

고민과 문제는 제목과 마찬가지로 re transformation을 진행하는데 저만 colony가 안나와요

사수분이랑 같은 조건에 진행을해도 유독 저만 plate에 colony가 안나와요

이유를 도저히 찾을수가 없어요

실험 방법에서 저의 실수가 있었다면 colony가 나오지 않는 이유를 금방 찾을거 같은데

사수님이 하시는 방법 그대로 카피해서 진행하고 있고, 사수님도 도대체 왜 안나오는지, 안 나올수가 없다고 제가 실험하는거 옆에서 봐보겠다고 같이 실험 해보자 말씀하셔서 사수님이랑 동시에 같이 챕터 밟으면서 진행해도 저만 colony가 잘 안나와요

그렇다고 제가 실험을 진행할때 막 장난친다던가 그런거는 전혀 없거든요

증명은 안되지만 주변에 계신 저희팀 다른팀 연구원분들도 저랑 실험을 몇번씩 같이 하고나면 제가 손이 좋다고 말씀하시고, 대학원도 꼭 가라고 말씀하시거든요

그런데, re transformation만 진행하면 이상하게 colony가 아예 안나올때도 있고, 막 1~5개 사이로 나올때도 많아요

지금까지 실험 진행하면서 제대로 사수님처럼 50개 이상으로 나온적은 몇번 없던거같아요

plate 말릴때도 사수님꺼랑 제꺼 제가 꺼내서 말리고 그러는데....

도대체 어디서 뭐가 잘못된걸까요..

이게 몇번을 이렇게 실패하니까 그냥 제가 손이 좋은게 아니라 똥손인거 아닌가 생각이 들어요

그래서 회사다보니까 실험을 해서 결과를 뽑아내야하는 기간이 정해져있어서

한 sample당 plate를 두장씩 꺼내서 만들거든요

근데 그러면 꼭 두장당 한장에서는 colony가 몇개 떠주는 바람에 다행히 다음 실험을 진행하고있어요

근데 언제까지나 이렇게 실험할 수는 없으니까요.. 사수분은 plate 마음껏 써도된다 너가 불안하면 두장 세장 네장 쓰고싶은대로 써도된다 라고 말씀하셔서

지금 당장은 두장씩 쓰고있는데....하...... 똥손인가..?

그리고, 인터넷 상에서는 cp cell이 잘 못 되면 안나온다고 말씀 하시는데, cp cell이 잘못된 경우는 전혀 없을거 같다고 생각이 들어요.
이유는. 일단 사수님도 제가 냉동고에서 꺼낸거 같이 사용하시고, cp cell를 만드시는 연구원분이 따로 계셔서 이상 없다고 생각이 들어요,
cp cell 녹일때도 ice위에 올려두고 천천히 해동하는 느낌으로 녹이거든요?

저 좀 도와주세요

지금 거의 몇달동안 머리통 깨지게 찾아보고 뭐해도 실험 방법에서 제 손이 문제인거같지 다른 요소들은 회사에서 만드는거로 사용하는거라서 전혀 문제가 없어 보이거든요

그리고 plate에 도말할때는 도말봉으로 안하고 비드로 깔고있어요 (이거는 그냥 번외인데 비드 넣고 흔들면서 도말할때 왜 저는 자꾸 plate에 비드 자국이 남죠...? 엄청 살살 흔드는거 같은데...그 비드 충격?자국도 저만 남아요...;;;;)

이상 간절해서 두서없이 하고싶은말 다 해버린사람의 긴 글을 읽어주셔서 감사합니다, 그러나,,,,,댓글로 좀 알려주세요..ㅠㅠ

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댓글 5개

2024.12.12

흠 이것만 봐서는 잘 모르겠네요. 사수분이랑 다 똑같이 진행하는데 본인만 제대로 안 나오는거면 재료나 시약 문제는 아닐 거고 뭔가 본인의 사소한 실험습관, 행동 같은 게 문제일 가능성이 높습니다. 비드를 너무 살살 흔들면 그것도 문제일 수 있어요. 균액이 충분히 플레이트에 도말되지 않으면 균액 도말 부위가 적으니 콜로니가 적게 뜰 수 있죠. 아니면 비드 흔들 때 비드가 플레이트 전체를 고루 지나가도록 잘 흔들어주시나요? 대충 흔들면 비드가 플레이트 가장자리만 따라서 돌기도 하거든요. 그것도 체크해보시고 균액은 도말할 때 플레이트당 얼마나 넣으시나요? 만약 10uL 이하로 소량 넣는다면 파이펫팅할 때 비드에 확실히 균액을 묻혀줘야하는데 균액이 비드에 묻는 걸 제대로 확인 안 하면 균액이 파이펫 팁에 표면장력 때문에 붙어있는 채로 딸려와서 그냥 팁 버릴 때 같이 버려질 수도 있어요. 그럴 때는 차라리 팁 끝을 비드에 닿을 정도로 갖다 대고 묻혀주는 게 좋죠. 하여튼 재료나 시약보단 본인의 습관적인 행동이 문제일 가능성이 높습니다.

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