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형질전환 ligation mix

2025.04.01

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형질전환할 때 50ul competent cell에 ligation mix를 13ul 만들고 가르쳐주시는 박사님이 6.5ul 넣으라고 하신 것 같은데 완전 새까맣게 잊고 12.5ul(왜 이런 애매한 숫자로 넣었는지 모르겠음) 넣었는데 competent cell에 별 이상 없겠죠??

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댓글 2개

2025.04.02

형질전환할 때 50ul competent cell에 ligation mix를 13ul 만들고 가르쳐주시는 박사님이 6.5ul 넣으라고 하신 것 같은데 완전 새까맣게 잊고 12.5ul(왜 이런 애매한 숫자로 넣었는지 모르겠음) 넣었는데 competent cell에 별 이상 없겠죠?

-> 여기에 묻는게 우선이 아니고, 님 실험 봐주는 박사님에게 보고 드리고 다시 재실험을 하는게 맞지 않음?

2025.04.03

제가 있던 연구실에서는 Ligation한 dna construct를 transformation하는 경우에는 보통 최대한 많은 양을 넣어줍니다. 한마디로 ligation 끝난 mixture를 통째로 다 넣었던 것 같네요. Ligation이 생각보다 잘 안되는 경우도 많아서 얼마나 제대로 ligation된 construct가 얼마나 들어있는지 알 수가 없거든요. 아마 선배가 말한 양보다 적게 넣으신 게 아니라면 큰 문제는 없을 겁니다. 그래도 선배한테 미리 말씀은 드리세요.

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